教學(xué)目的與要求：
深入了解植物細(xì)胞在離體條件下的生長特性，掌握植物細(xì)胞懸浮系的建立以及種細(xì)胞的
篩選方法。
第一節(jié)、懸浮培養(yǎng)(suspension culture)
一、懸浮培養(yǎng)
懸浮培養(yǎng)是指將單個(gè)游離細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)增殖的技術(shù)。
1．起始培養(yǎng)物的建立
? 選擇適宜的外植體：幼胚、胚軸、子葉是最常使用的外植體。
? 選擇適宜的培養(yǎng)基：較高濃度激素濃度；必要的附加物質(zhì)。
? 愈傷組織的要求：松散性好、增殖快、再生能力強(qiáng)
2．懸浮系的建立
3．懸浮細(xì)胞的生長與增殖
懸浮培養(yǎng)與固體培養(yǎng)比較有三個(gè)優(yōu)點(diǎn)：一是增加培養(yǎng)細(xì)胞與培養(yǎng)液的接觸面，改善營養(yǎng)
供應(yīng)；二是在振蕩條件下可避免細(xì)胞代謝產(chǎn)生的有害物質(zhì)在局部積累而對細(xì)胞自身產(chǎn)生毒
害；三是振蕩培養(yǎng)可以適當(dāng)改善氣體的交換。
影響懸浮細(xì)胞生長的因素：
? 起始愈傷組織的質(zhì)量
? 接種細(xì)胞密度
? 培養(yǎng)條件：方式、溫度、
? 繼代周期
一個(gè)成功的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)體系必須滿足三個(gè)條件：
? 懸浮培養(yǎng)物分散性良好，細(xì)胞團(tuán)較小，一般在30～50個(gè)細(xì)胞以下，在實(shí)際培養(yǎng)中
很少有完全由單細(xì)胞組成的植物細(xì)胞懸浮系。
? 均一性好，細(xì)胞形狀和細(xì)胞團(tuán)大小大致相同。懸浮系外觀為大小均一的小顆粒，
培養(yǎng)基清澈透亮，細(xì)胞色澤呈鮮艷的乳白或淡黃色。
? 細(xì)胞生長迅速，懸浮細(xì)胞的生長量一般2～3天甚至更短時(shí)間便可增加一倍。
第三節(jié)、植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)與次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)
一、概述
植物次生代謝產(chǎn)物是指植物中一大類并非植物生長發(fā)育所必需的小分子有機(jī)化和物，其
產(chǎn)生和分布通常有種屬、器官組織和生長發(fā)育期的特異性。次生產(chǎn)物在植物中的合成與分解
過程稱為次生代謝。
1． 植物產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的類型
植物次生產(chǎn)物種類繁多（據(jù)保守估計(jì)已超過2萬種），根據(jù)分子結(jié)構(gòu)不同大致分為：
酚類化合物－黃酮類
單酚類
醌 類（苯醌、萘醌、蒽醌）
萜類化合物－三萜皂甙
甾體皂甙
單萜、倍半萜、二萜
含氮化合物－生物堿（真生物堿、偽生物堿、原生物堿）
胺類（伯、仲、叔、季胺）
非蛋白質(zhì)氨基酸
生氰甙
多炔類、有機(jī)酸等
2．植物次生代謝產(chǎn)物在醫(yī)藥、食品、輕化工業(yè)等領(lǐng)域具有重要意義。
李時(shí)珍（1593）在《本草綱目》中所開列的1892種藥物絕大多數(shù)是植物藥物，目前仍
有約25％的法定藥品來自植物。其藥物的有效成分均為次生產(chǎn)物。
許多植物次生代謝產(chǎn)物是優(yōu)良的食品添加劑和名貴化妝品原料。有些是生物毒素的主
要來源，可以用于殺蟲、殺菌，而對環(huán)境和人畜無害，是理想的環(huán)保產(chǎn)品。
3．規(guī)模化細(xì)胞培養(yǎng)是生產(chǎn)植物次生產(chǎn)物的理想途徑
? 保護(hù)生態(tài)環(huán)境
? 提高生產(chǎn)效率
? 發(fā)展新型生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)